1. Microbiota vaginal:
El papel de los probióticos en las infecciones
vaginales y patologías cervicales
Dr. Fernando Losa
Clínica Sagrada Familia Barcelona
Grupo de Interés Salud Vaginal de laAEEM
2. Celulas Eucariotas
1013
Celulas Bacterianas
1014
La mayoría de las comunidades bacterianas coexisten en relaciones
mutualistas con el huésped humano, y se sabe que nuestra
microbiota evolucionó junto con nuestro genoma
( Moran y Sloan, 2015 ).
metagenoma
3. Celulas Eucariotas
1013
Celulas Bacterianas
1014
La mayoría de las comunidades bacterianas coexisten en relaciones
mutualistas con el huésped humano, y se sabe que nuestra
microbiota evolucionó junto con nuestro genoma
( Moran y Sloan, 2015 ).
metagenoma
4. Celulas Eucariotas
1013
Celulas Bacterianas
1014
La mayoría de las comunidades bacterianas coexisten en relaciones
mutualistas con el huésped humano, y se sabe que nuestra
microbiota evolucionó junto con nuestro genoma
( Moran y Sloan, 2015 ).
metagenoma
5. microbiota: composición
Depende de los estrógenos Varía con la edad
RN: Lactobacilos (LB) de la madre
Premenárquicas: Microbiota transitoria y de origen
cutáneo perineal e intestinal
Edad fértil: 70% lactobacilo (a pesar de la descarga
menstrual y las relaciones sexuales)
Embarazo: lactobacilos aumentan al final
(gracias al aumento del grosor del epitelio y con él
la secreción de nutrientes)
Posmenopáusicas:microbiota cutánea e intestinal
(ausencia de estrógenos)
6. Géneros de microorganismos que se encuentran
en la vagina de mujeres sanas
Cocos y bacilos grampositivos
anaerobios aerotolerantes
Lactobacillus
Streptococcus
Cocos y bacilos grampositivos
anaerobios facultativos
Corynebacterium Gardnerella
Staphylococcus (fundamentalmente S.
epidermidis
Bacilos gramnegativos
anaerobios facultativos
Escherichia
Klebsiella
Proteus
Micoplasmas Mycoplasma (sobre todo M. hominis)
Ureaplasma
Bacilos y cocos grampositivos
anaerobios estrictos
Atopobium Peptococcus
Peptoseptococcus Clostridium
Bifidobacterium Propionibacterium
Eubacterium
Bacilos gramnegativos anaerobios
estrictos
Bacteroides
Prevotella
7. LACTOBACILOS
Estrógenos
Glucogeno
Acido láctico
H2O2
Lactobacilos
L. crispatus
L. iners
L. gasseri
L. fermentum
L. jensenii
Predominantes
L. salivarius
L.vaginalis
L. plantarum
Ocasionalmente
L.rhamnosus
L. casei
Menos frecuencia
La producción de ácido láctico disminuye
pH vaginal crea un ambiente desfavorable
para el crecimiento de bacterias patógenas
( O'Hanlon et al, 2013 , Petrova et al, 2015 ).
8. Funciones:
Proteger frente a la colonización y
proliferación de microorganismos
patógenos.
Mecanismos de acción:
o Inhibición de la adherencia a la mucosa
vaginal.
o Competición por los nutrientes.
o Producción de sustancias antimicrobianas:
• Ácido láctico
• Mantenimiento del pH vaginal ácido.
• Peróxido de hidrógeno (H2O2).
• Péptidos antimicrobianos
(Bacteriocinas).
o Inmunomodulación
Microbiota vaginal
La edad, el embarazo, la
actividad sexual, el tabaquismo y
las hormonas exógenas son
algunos de los factores que
influyen en la composición de la
VMB
9. Que sabemos a dia de hoy de la microbiota vaginal? VMB
Los estudios de Pirosecuenciación han aportado un información del
comportamiento bacteriano. METABOLÓMICA.
Diversos estudios:
el predominio de lactobacilos están asociados con un micro-entorno
vaginal sano.
la mayoría de las mujeres tienen un microbioma vaginal estable un
factor importante implicado en la protección del huésped de diversos
patógenos bacterianos, fúngicos y virales.
la vaginosis bacteriana (BV) se describe mejor como una disbiosis
polibacteriana. Diversidad bacteriana de cérvix uterino es mayor en las
mujeres con VB (VAGINOSIS BACTERIANA).
en mujeres posmenopáusicas la VMB es por lo general estable y diversa.
Cuanto más diversidad bacteriana: estabilidad disminuida.
La microbiota cervical es similar a la VMB, excepto que las cargas
bacterianas son más bajas.
El VMB de la madre juega un papel esencial en la colonización inicial de
los recién nacidos, lo cual tiene consecuencias para el sistema
inmunológico y el neurodesarrollo ( Dominguez-Bello et al., 2010 ).
10. Lactobacillus crispatus da
mucha estabilidad
En HIV la mayoría de
estudios encontraron hacia
la disminución de
lactobacilos (y en particular
L. Crispatus )
En VPH también parece
estar asociado con una
reducción de lactobacilos y
el aumento de la diversidad
VMB .
Con mayor diversidad
bacteriana menor
aclaramiento del virus y
mayor progresión a
malignidad.
la presencia de la VB aumenta el riesgo de adquisición de
infecciones de transmisión sexual.
Witkin, 2015
11. Embarazo:
altos niveles de estradiol
se asocia con altos niveles de lactobacilos, especialmente L. Crispatus
baja diversidad bacteriana .
Una microbiota dominada por L. Iners o L. gasseri en 1er Trimestre
más probable que evolucione a BV más adelante durante el embarazo;
L. crispatus se asocia con una mayor estabilidad de la comunidad
vaginal. Verstraelen H, BMC Microbiol. 2009
12. En Postmenopáusica:
niveles más bajos de la
microbiota
reducción de L. Crispatus
diversidad de Lactobacillus,
en comparación con las
mujeres en edad reproductiva
Rebecca M. Brotman, PhD, MPH,1,2Michelle D. Shardell, PhD,2Pawe
Menopause. 2014 May; 21 (5): 450-458.
menopausia y microbiota vaginal
Maturitas. 2016 Sep; 91: 42-
50.
El THS Lactobacilos
13. la presencia de la VB aumenta el riesgo de
adquisición de infecciones de transmisión
sexual.
Microbiota saludable
• Ausencia de síntomas
• Ausencia de infecciones
• Buen resultado del embarazo
• Dominado principalmente por
Lactobacillus, biomarcador útil para
evaluar la salud y la enfermedad.
Vagina Sana
16. • Las infecciones vulvovaginales son un motivo de consulta muy
frecuente en Atención Primaria, Especializada y Urgencias
Hospitalarias, llegando a representar el 20% de las Consultas
Ginecológicas.
• La VB es la más prevalente en USA y la segunda en Europa.
• El impacto de la VB sobre la salud de la mujer es importante.
• Las recurrencias son frecuentes.
• Uso de probióticos en su tratamiento.
Vaginosis bacteriana (VB): Introducción
17. ALTERACIÓN DEL ECOSISTEMA MICROBIANO VAGINAL
La VB es el resultado de la sustitución de lactobacilos
por altas concentraciones de anaerobios
Lactobacillus
Anaerobios
gramnegativos
Vaginosis (VB): Definición
19. MECANISMOS:
• Persistencia factores de riesgo
• Resistencia a los antibióticos
• Reinfección
• Persistencia de la disbiósis vaginal
RESTABLECER EL
ECOSISTEMA VAGINAL
20% al cabo de
1 semana
15% - 30%
al cabo de
1-3 meses
70% a los
12 meses50%
Asintomáticas
20. VB: Complicaciones
NO EMBARAZADA EMBARAZADA
EIP Aborto
Riesgo ETS (VIH, VPV) RPM
Endometritis Parto pretérmino
Infecciones postoperatorias Corioamnionitis
Esterilidad de causa tubárica Endometritis postparto
21. Conclusión: Este metaanalisis muestra la asociación de la vaginosis
bacteriana y la infección cervical por HPV
Conclusión: A pesar de que la mayoria de estudios fueron transversales
y con alta heterogeneidad, este meta-analisis confirman la relación
entre BV y CIN
23. “Las infecciones del tracto urogenital son un motivo frecuente
de consulta en atención primaria y representan entre el 15-
20% de TODAS LAS CONSULTAS GINECOLÓGICAS”
1ª CAUSA DE VAGINITIS en adolescentes y mujeres en edad fértil en
Europa, por delante de la vaginosis bacteriana
25-40% mujeres PORTADORAS ASINTOMÁTICAS
La microbiota lactobacilar NO se reduce en candidiasis. Cepas
diferentes (cepas que no producen H2O2)
24. 75% han tenido un
episodio en su
vida
40-50%
más de 1
episodio
5-15%
VVCR (>4
episodios
anuales)
• Sobrecrecimiento de la cándida (25% mujeres portadoras)
• La Microbiota lactobacilar no se reduce en la candidiasis
• Lactobacilos presentes en candidiasis pero las cepas son
diferentes (cepas que no producen H2O2)
BMC Womens Health .2014
Sujit D Rathod and Patricia A Buffler
25.
26. • Una bacteria probiótica se cataloga en base a:
• Género - Especie - Cepa:
• Ejemplos:
• Lactobacillus salivarius CECT5713
•Bifidobacterium infantis 35264
•Lactobacillus fermentum LF16
• Lactobacillus LA 02 acidophilus
•Lactobacillus fermentum LF15
•Lactobacillus Rhamnosus LR06
• Las propiedades probióticas de una cepa no se pueden extrapolar a
otras cepas de la misma especie.
• La eficacia de cada una de las cepas depende de:
• Dosificación (Concentración de probiótico, habitualmente se expresa
como UFC – unidades formadoras de colonias)
• Posología.
• Vía de administración.
Probióticos
I Consenso de Probióticos de la AEEM2012
Estudios en candidiasis
Estudios en vaginosis
27. Porqué se utilizan
Bases de utilización
Restablecen la microbiota vaginal
Reducen el riesgo de recidivas
Dificultan el desarrollo del patógeno
Papel de los probióticos y prebióticos
28. Asociación Española de Estudio de la Menopausia : AEEM
Consenso sobre la utilización probiótica de lactobacilos en la
prevención/terapia de la infección vaginal (2012)
Sociedad Española de Ginecología y Obstetricia: SEGO
Protocolo de diagnóstico y tratamiento de las infecciones vulvovaginales
(Protocolo actualizado 2016)
Cuándo se deben utilizar
Papel de los probióticos y prebióticos
Dres. F.Losa/ S. Palacios 2017
29. Se consideran útiles en la prevención de las
recurrencias de las infecciones vaginales,
incluyendo la vulvovaginitis candidiásica recurrente.
Cuándo se deben utilizar
Papel de los probióticos y prebióticos
30. Seguridad
Los lactobacilos tienen un poder patogénico escaso.
GRAS: Generally Regarded As Safe
FDA: Food and Drug Administration
GRAS QPS
FDA EFSA
QPS: Qualified Presumption of Safety
EFSA: European Food Safety Authority
Papel de los probióticos y prebióticos
31. Hábitat
cuerpo
Predominando Phyla
Boca Firmicutes (por ejemplo, Streptococcus ) > Proteobacteria
(por ejemplo, Haemophilus ), Bacteroidetes (por ejemplo,
Prevotella )
Intestino Bacteroidetes (por ejemplo, Bacteroides ), Firmicutes (por
ejemplo, Streptococcus )
Piel Actinobacteria (por ejemplo, Propionibacterium ) > Firmicutes
(por ejemplo, Staphylococcus )
Vagina Firmicutes (por ejemplo, Lactobacillus )
La Micobiota urogenital aporta el 9% de todo el microbioma humano comparado con el
tracto gastrointestinal, que representa el 29% del total
( Peterson et al., 2009 ).
32. Cómo se administran ambos
Vía vaginal presenta algunas ventajas
Papel de los probióticos y prebióticos
- Administración en el lugar directo donde se busca la acción.
- No afectación de la absorción ( se evita el paso gástrico) por
problemas gastrointestinales.
- Permisividad de la administración de dosis más bajas.
- Liberación de cargas de probióticos más elevadas.
- Menor frecuencia de tomas.
- Se garantiza una dispersión correcta y uniforme del probiótico.
33. • Empieza a haber confusión con los Probióticos existentes
en la industria.
• Escasos trabajos investigación en todos los productos del
mercado.
• Precisamos Pautas en el tratamiento de infecciones
Agudas y en las Recurrencias.
• Nos interesan más trabajos de investigación en las
infecciones más frecuentes y sobre todo en las Recidivas
34. Probioticos en vaginosis
Eficacia para el tratamiento y la prevención de la leucorrea provocada por
vaginosis bacteriana. En Primoinfección y Recidivas.
1) Probióticos:
Lactobacillus
fermentum LF16 y
Lactobacillus
rhamnosus LR06
2) Prebióticos:
Fructooligosacáridos y
arabinogalactano.
L. Fermentum LF15: 88’5% de inhibición de Gardnerella vaginalis en 48h
35. LadyFLOR: COMPONENTES FUNCIONALES Y
PROPIEDADES
Fase aguda: 1 comprimido vaginal durante 7 días consecutivos, seguidos por 1
comprimido vaginal cada 3 días, durante 3 semanas más.
Fase de prevención: 1 comprimido vaginal a la semana, durante el siguiente mes.
91,67%
de curación al mes de tratamiento
(Nuget score < 7)
Estudio en mujeres con Vaginosis Bacteriana
36. Candida:Probióticos
1) Probióticos: Lactobacillus fermentum LF16
y Lactobacillus LA 02 acidophilus
2) Prebióticos: Fructooligosacáridos y
arabinogalactano
Estudio en mujeres con
Vulvovaginitis Candidiásica (VVC)2
Fase aguda: 1 comprimido vaginal durante 7 días,
seguidos por 1 comprimido vaginal cada 3 días
durante 3 semanas.
Fase de prevención: 1 comprimido vaginal a la
semana durante 1 mes.
37. 1 capsula/diaria durante 6-7 dias
consecutivos
Seguido de 1-2 capsulas/semanal
durante 4 semanas.
Tratamiento
Lactobacilus Plantarum P 17630(1)
Lactobacillus plantarum I 1001(2)
Lactobacillus fermentum LF16 (3,4)
y Lactobacillus LA 02 acidophilus
TRATAMIENTO CON PROBIOTICOS en VVCR (recurrente)
Estudios en
candidiasis
Recurrente
1.Vicariotto F, et al. Effectiveness of the Association of 2 Probiotic Strains Formulated in a slow Release Vaginal product, in Women Affected by Vulvovaginal Candidiasis. J. Clin
Gastreenterol. Vol 46, supp. 1 , Oct 20123.
2.S. Palacios , J. Espadaler , J. M. Fernández-Moya , C. Prieto , y N. Salas ¿Es posible prevenir la vulvovaginitis recurrente? El papel deLactobacillus plantarum I1001 (CECT7504). Eur J
Clin Microbiol Infect Dis . de 2016; 35 (10): 1701-1708.
3.Murina A, et al. Can Lactobacillus fermentum LF10 and Lactobacillus acidophilus LA02 in a slow-release vaginal product be useful for prevention of recurrent vulvovaginal candidiasis?:
A clinical study. J Clin Gastroenterol. 2014;48(suppl 1):S102
4.Reid G, Dols J, Miller W. Targeting the vaginal microbiota with probiotics as a means to counteract infections. Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 2009 Nov;12(6):583-7...
5.Falagas ME, Betsi GI, Athanasiou S. Probiotics for prevention of recurrent vulvovaginal candidiasis: a review. J Antimicrob Chemother. 2006 Aug;58(2):266-72.
1-2 capsulas por semana durante 6
meses
Mantenimiento
(1-5)
38. Tratamiento adyuvante
• Tras completar pautas de tratamiento según protocolos contrastados con
fungicidas.
Uso preventivo
Situaciones de susceptibilidad con historia de episodios clínicos confirmados:
• Pre-menstrual
(4 a 5 dias antes de la regla)
• Otras: gestación, anticoncepción hormonal, etc.
Fase aguda: 1 comprimido vaginal durante 7 días,
seguidos por 1 comprimido vaginal cada 3 días
durante 3 semanas.
Fase de prevención: 1 comprimido vaginal a la
semana durante 1 mes.
Dres. F.Losa/ S. Palacios
VVCRecurrente: Mantener 1-2 com vaginales a la semana durante 6 meses.
39. Dres. F.Losa/ S. Palacios
Tratamiento inicial en primoinfección y recurrencias
• Adminstrar via vaginal minimo 6-7 días.
• Administrar tras el tratamiento farmacológico específico. (coadyuvancia)
• Pauta de administración:
• Los EC disponibles aconsejan un tratamiento de entre 5–10 días utilizando la vía vaginal.
• En el caso de la vía oral el tratamiento debería ser más prolongado.
Prevención de recurrencias
• Uso post menstrual , cuando la mucosa puede estar más despoblada de lactobacilos y el
pH vaginal transitoriamente elevado.
1 capsula/diaria durante 6-7 dias consecutivos
Seguido de 1 capsula/semanal durante 4 semanas
Se puede mantener 1 capsula/semanal durante 20 semanas ( se completan 6 meses)
• Dosificación
• Oral: Mínimo - 109-1010 UFC / día.
Vaginal: Mínimo - 108 UFC / día.
40. Infección por VPH y Microbiota vaginal
Gao et al. BMC Infectious Diseases 2013, 13:271
Audirac-Chalifour A. PLOS one 2016.
41. Infeccion HPV
Consideraciones en la prevención
Intentar conseguir:
• Buena epitelización del epitelio cervical evitando el mayor área
limite de la zona de transformación susceptible de la
integración del HPV.
• Re balance/normalización de la microbiota con el aumento de la
presencia de lactobacilos y disminución de la diversidad
microbiana produciendo un aumento del aclaramiento y
progresión del HVP.
• Mejorar el estado inmunitario local, en el área de acción del VPH,
puede contrarrestar el ambiente antiinflamatorio creado y con
ello facilitar el aclaramiento del VPH.
42. Estudio Epicervix
Estudio Epicervix:
Estudio Piloto para evaluar el efecto de un gel vaginal formulado a base
de Coriolus Versicolor y un prebiótico sobre la epitelización del cérvix y
la microbiota vaginal en mujeres con VPH positivo sin lesión
colposcópica. (21 pacientes).
Diseño:Estudio observacional de tipo exploratorio, unicéntrico,
prospectivo no controlado.
Tratamiento y duración:
-Se administra el gel una vez al día antes de acostarse durante 21 días
consecutivos. Deberán iniciar el tratamiento con posterioridad a la
finalización del actual o siguiente periodo menstrual.
-Visita inicial y final.
Serrano Luis and González Silvia. Effect of a non-hormonal Coriolus versicolor vaginal gel among positive-HPV
women with no colposcopy cervical lesions. A pilot study. Poster in Eurogin 201 7
43. 40% of patients improved epithelization
degree
80% reached normality (score of 5).
- Grado de Epitelización
Estudio Epicervix Resultados en la
Epitelización del cervix
n=21
p<0.006
El 40% de los pacientes mejoran el grado
de epitelización
El 80% alcanzaron la normalidad
(puntuación de 5).
Poster
Cortesía Dr. Serrano Luis and González Silvia. Effect of a non-hormonal Coriolus versicolor vaginal gel among
positive-HPV women with no colposcopy cervical lesions. A pilot study. Poster in Eurogin 201 7
46. Microbiota:
conjunto de comunidades microbianas que coloniza un determinado
nicho ecológico , sin causar patología
microbiota autóctona o residente
caracterizada por aquellos
microorganismos que colonizan la
vagina durante un tiempo prolongado y
pueden participar en las funciones
fisiológicas del órgano.
microbiota transitoria
que presenta fluctuaciones continuas en
su población relacionadas con la propia
fisiología.
identificadas unas 250 especies de
bacterias en la vagina
49. Cortesía Dr.Prof. G. Miniello
Epitelización tras la aplicación de 21 días
de gel a base de coriolus y prebióticos
Día 0
Día 45
50. Julio Gálvez PhD.
Alba Rodríguez-Nogales PhD.
Department of Pharmacology
University of Granada
Granada (Spain).
BASAL FINAL
0
500
1000
1500
2000
CHAO INDEX
BASAL FINAL
0
1
2
3
4
5
SHANNNON INDEX
BASAL FINAL
0.0
0.2
0.4
0.6
PIELOU INDEX
Estudio Epicervix
CHARACTERIZATION OF EPICERVIX MICROBIOTA IN HUMAN SAMPLES”
51. RESULTADOS EN LA MICROBIOTA VAGINAL
Microbiota evaluated by 16S rRNA gene pyrosequencing*
BASAL FINAL
0
1
2
3
4
5
SHANNNON INDEX
Phylogenetic diversity of the gut microbiota using Shannon diversity index.
*CIBER-EHD, Department of Pharmacology, ibs.GRANADA, Center for Biomedical Research (CIBM), University of
Granada, Granada, Spain
55. 0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
Percentage
L. gasseri
Basal Final
0
20
40
60
80
Percentage
L. iners
Basal Final
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
Percentage
L. crispatus
Basal Final
0
2
4
6
8
10
Percentage
L. acidophilus
Basal Final
0.000
0.002
0.004
0.006
0.008
0.010
Percentage
Clostridium perfringens
Basal Final
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
Percentage
" Clostridium sp. enrichment culture clone 7-14"
Basal Final
0
1
2
3
Percentage
L. vaginalis
Basal Final
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
Percentage
L.lactis
Basal Final
2.- Phylum Firmicutes:
Lactobacillus
56. microbiota: composición
Depende de los estrógenos Varía con la edad
RN: Lactobacilos (LB) de la madre
Premenárquicas: Microbiota transitoria y de origen
cutáneo perineal e intestinal
Edad fértil: 70% lactobacilo (a pesar de la descarga
menstrual y las relaciones sexuales)
Embarazo: lactobacilos aumentan al final
(gracias al aumento del grosor del epitelio y con él
la secreción de nutrientes)
Posmenopáusicas:microbiota cutánea e intestinal
(ausencia de estrógenos)
57. Conclusiones
ESTUDIO EPICERVIX
El tratamiento hace posible la modificación de la microbiota.
Reduciendo la diversidad microbiana.
Hallazgo claro de Disbiosis vaginal en mujeres portadoras de HPV.
El incremento de los Lactobacilos (iners y cripatus) sugiere un regreso
de la microbiota a la normalidad según este estudio.
El tratamiento ha demostrado un aumento en la epitelización del cervix
uterino en mujeres HPV-positivas sin lesiones cervicales.
58. Conclusiones (1)
• La microbiota vaginal es el conjunto de microorganismos que habitan en
vagina en condiciones fisiológicas y que con la excepción del colon,
constituyen la concentración más alta de bacterias del cuerpo de la mujer.
• El mantenimiento del equilibrio dinámico en las microbiotas intestinal y
vaginal preserva de múltiples patologías sistémicas y locales. La síntesis de
antimicrobianos por los lactobacilos resulta crucial para el mantenimiento
de la homeostasis de la microbiota vaginal y mejora de la inmunidad local.
• De importancia en la infección por HPV donde suele presentar una
diversidad bacteriana aumentada con disminución de los lactobacilus en su
progresión hacia la malignidad.
• Los probióticos se están incorporando como una estrategia efectiva más en
el tratamiento de patologías inflamatorias intestinales y patologías
ginecológicas: vaginitis micótica y vaginosis. Mastitis. Infecciones
urinarias…etc..
59. Conclusiones (2)
• Los probióticos suponen una alternativa eficaz, como coadyuvantes y como
tratamiento incial de infecciones vaginales (micosis y vaginosis) y sus
recurrencias.
• La SEGO ha incluido la recomendación de los probióticos en la prevención
de las recidivas. Siendo esta recomendación más favorable en la población
de mayor riesgo de recurrencias, donde los lactobacilos son una buena
alternativa coste-beneficio más segura y sin efectos secundarios ,
consiguiendo el mantenimiento de una buena Salud Vaginal.